磷酸盐缓冲液 TRIS缓冲液和磷酸盐缓冲液的区别

生物缓冲液常用于生化研究实验，意义重大。能抵抗少量外界强酸强碱的影响，保持PH值基本不变。常用的生物缓冲液包括Tris缓冲液、PBS缓冲液、CAPS缓冲液、MOPS缓冲液、TAPS缓冲液和EPPS缓冲液。本文从几个方面对最常用的Tris缓冲液和PBS缓冲液进行了比较。

1.缓冲范围

Tris为弱碱，分子式为C4H11NO3，分子量为121.14，25°C时pKa为8.1，其缓冲溶液的有效缓冲范围在ph 7.0 ~ 9.2之间。生化实验中常用的pH值有6.8、7.4、8.0和8.8。Tris广泛应用于生物化学和分子生物学实验中缓冲液的制备，甚至有超过磷酸盐缓冲液的趋势。

磷酸盐缓冲液是以磷酸盐为pH缓冲剂，氯化钠为渗透压平衡剂的盐溶液。常用磷酸钠缓冲液和磷酸钾缓冲液。由于它们的二级解离，缓冲液pH范围宽，是生化研究中应用最广泛的缓冲液。

2.配置方法

制备Tris-HCl缓冲液有两种方法:分别制备Tris和HCl溶液，然后按照常用表中列出的体积混合。但由于标准浓度的稀盐酸难以制备，所以常用另一种方法:以Tris-HCl缓冲液的制备为例:首先将Tris碱溶于950 ml ~ 970 ml去离子水中，边搅拌边滴加HCl，用pH计测量溶液的pH值至所需的pH值，然后加水。

磷酸盐缓冲液的制备方法:称取NaCl、KCl、KH2PO4、K2HPO4，溶于800 mL蒸馏水中，用HCl调节溶液pH值至7.4，最后加入蒸馏水至1 L定容，4℃冰箱保存。需要注意的是，浓度通常指的是缓冲液中所有磷酸根的浓度，而不是Na+或K+的浓度，只是用来调节渗透压。配制磷酸盐缓冲液时，钾盐优于钠盐。钠盐在低温下不易溶解，而钾盐溶解度较高。

3.使用领域

Tris缓冲液和甘氨酸在电泳缓冲液中形成缓冲体系，稳定ph值；用Tris-HCl缓冲体系稳定凝胶中的pH值；广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；Tris缓冲液的低离子强度也可以用来形成线虫的中间纤维；在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制备“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和保存；将调好pH值的酸性溶液换成乙酸，得到TAE缓冲液，将TBE缓冲液换成硼酸，得到TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验。

磷酸盐缓冲溶液通常，活性生物制剂应该用磷酸盐缓冲溶液稀释。原因是它具有盐平衡和调节适宜pH值的缓冲作用。蒸馏水没有盐平衡效应，会破坏生物蛋白的结构和生物特性生理盐水不具备调节pH的功能，在最佳条件下不能保证完整的活性物质参与生物反应，因此PBS是首选。当然，PBS也不是万能的。一些生物活性物质需要更高的条件，因此需要向平衡缓冲液中加入更多的成分来维持最佳条件，以确保生物活性物质保持其最完整的特性。因此，PBS主要用于细胞实验，其缓冲范围最适合中性。

在生化实验中，要慎重选择缓冲液，不仅要考虑缓冲液的缓冲范围，还要考虑缓冲液的使用环境。湖北鑫德盛材料多年来一直致力于生物缓冲液的生产和开发。德胜拥有独立的R&D团队，在R&D有丰富的实践经验和产品生产。目前德胜生产的生物缓冲液等产品已销往全球多个国家，并获得好评和复购，与众多国外客户达成长期合作。如果你感兴趣，你可以打电话给我们寻求建议。德胜欢迎您的来电。